جداسازی و شناسایی میکروفلورای استخرهای پرورشی و دستگاه گوارش میگوی سفید غربی (لیتوپنئوس وانامی) و ارزیابی آن ها به عنوان پروبیوتیک

نوع مقاله: مقاله پژوهشی

نویسندگان

1 دانشگاه آزاد اسلامی، واحد جهرم، گروه میکروبیولوژی

2 گروه بیوتکنولوژی آبزیان، مرکز آموزش جهاد کشاورزی بوشهر

چکیده

سابقه و هدف: امروزه پرورش میگو در اکثر کشورهای استوایی رایج شده است. اما در حال حاضر بیماری‌های فراوانی پرورش میگوی سراسر جهان را تحت تاثیر قرار داده اند. عوامل عفونی باکتریایی مهم ترین معضل بهداشتی بیماری های میگوی پرورشی هستند. هدف از این پژوهش، جداسازی و شناسایی فلور باکتریایی آب پرورشی و دستگاه گوارش میگوی سفید غربی (لیتوپنئوس وانامی) در استخرهای پرورشی استان بوشهر و بررسی آنها به عنوان پروبیوتیک می باشد. مواد و روش ها: نمونه های میگو و آب 10 استخر پرورش میگوی استان بوشهر به آزمایشگاه منتقل شدند. نمونه های میگو کالبد شکافی گردیدند. باکتری های جداسازی شده بر اساس آزمون های بیوشیمیایی، ریخت شناسی و نرم افزار بیولوگ شناسایی شدند. سپس با استفاده از دو روش چاهک گذاری و دیسک گذاری فعالیت ضدباکتریایی آن ها در برابر 6 باکتری بیماری زا ارزیابی گردید. یافته ها: از آب پرورشی و دستگاه گوارش میگو 12 جنس مختلف از باکتری ها جداسازی شدند. بیشترین فراوانی باکتری‌های جداسازی شده مربوط به باسیلوس، ویبریو و سودوموناس بود. از بین جدایه ها باکتری های باسیلوس، میکروکوکوس و کورینه باکتریوم بیشترین اثر آنتاگونیستی را در برابر باکتری های پاتوژن مورد بررسی از خود نشان دادند. نتیجه گیری: تقریباً تمام باکتری های جداسازی شده از دستگاه گوارش میگو در استخرهای پرورشی نیز یافت شدند. باکتری هایی مانند باسیلوس با تولید مواد ضدمیکروبی مانع رشد پاتوژن ها می شوند.

کلیدواژه‌ها


1. Barman P, Banerjee A, Bandyopadhyay P, Mondal  KC, Das Mohapatra PK. Isolation, identification and molecular characterization of potential probiotic bacterium, Bacillus subtilis PPP 13 from Penaeus monodon. Biotechnol Bioinf Bioeng. 2011; 1(4): 473-482.

2. Lightner DV. Red disease of penaeid shrimp. In: Sindermann CJ, Lightner DV (eds.). Disease diagnosis and control in north American marine aquaculture. Developments in aquaculture and Fisheries science 17. Elsevier, Amsterdam. 1988;  pp. 100-103.

3. Nash G, Charetana N, Cholada T, Anutra A, Phusit P, Pongcham R. Vibriosis and its control in pond-reared Penaeus monodon in Thailand In: Diseases in Asian aquaculture (Eds: Shariff  M, Subasinghe R, Arthur JR). Fish Health section, Asian Fisheries society, Manila. Phillippines. 1992; pp. 143-145.

4. Keysami MA, Saad CR, Daud HM, Sijam K, Alimon AR. Effect of Probiotic on larval growth and development rate of Macrobrachium rosenbergii (deMan). Kustem 4th Annual Seminar held at Primula Beach Resort, Kuala Terengganu, Malaysia during May 2-3, 2005. Abstract book, p: 80.

5. Keysami MA, Saad CR, Daud HM, Sijam K, Alimon AR. Effects of putative probiotic bacterium on the survival and growth of juvenile Macrobrachium rosenbergii (deMan). The Asian Aquafeeds 2005 Seminar which is scheduled for April 12-13, 2005, in Kuala Lumpur, Malaysia. Abstract book, p: 44.

6. Zokaeifar H, Balcazar JL, Kamarudin MS, Sijam K, Arshad A, Saad CR. Selection and identification of non-pathogenic bacteria isolated from fermented pickles with antagonistic properties against two shrimp pathogens. J Antibiot. 2012; 65(6): 289-294.

7. Iranian Shrimp Research Center. Available at http://www.isrc.ir

8. MacFaddin JF. Biochemical tests for identification of medical bacteria. 2nd edn. Williams and Wilkins, Baltimore, MD. 1980; p: 527.

9. Keysami MA, Saad CR, Daud HM, Sijam K, Alimon AR. To screen three putative bacteria in juvenile Macrobrachium rosenbergii as probiotic based on in-vitro growth characteristics. MSA Golden Jubilee International Science Congress (ISC). August 3-6, 2005 Putra World Trade Centre, Kuala Lumpur, Malaysia. Abstract book, pp: 144-145.

10. Keysami MA, Saad CR, Daud HM, Sijam K, Alimon AR. A preliminary study to isolation and identification of the aerobic putative bacterial flora in juvenile giant freshwater prawn, Macrobrachium rosenbergii (de Man). Kustem 4th Annual Seminar held at Primula Beach Resort, Kuala Terengganu, Malaysia during May 2-3, 2005. Abstract book: 78.

11. Chythanya R, Karunasagar I. Inhibition of shrimp pathogenic Vibrios by marine Pseudomonas 1-2 strain. Aquacult. 2002; 208(1-2): 1-10.

12. Rattanachuay P, Kantachote D, Suntinanalert P. Selection of proteolytic bacteria with ability to inhibit Vibrio harveyi during white shrimp (Litopenaeus vannamei) cultivation. Technol. 2007; 29(2): 235-243

13. Keysami MA, Saad CR, Daud HM, Sijam K, Alimon AR. Screening putative bacteria of Macrobrachium rosenbergii juvenile as potential applications for control of pathogenic bacteria. Kustem 4th Annual Seminar held at Primula Beach Resort, Kuala Terengganu, Malaysia during May 2-3, 2005. Abstract book: 122.

14. Phatarpekar PV, KenkreVD, Sreepada RA, Desai UM, Achuthakutty CT. Bacterial flora associated with larval rearing of the giant freshwater prawn, Macrobrachium rosenbergii. Aquacult. 2002; 203(3-4): 279-291.

15. Miyamoto G, Brock J, Nakamura R, Nakagawa L, Shimojo R, Sato V, Akita G. A preliminary microbiological and water quality survey of two Hawaiian prawn (Macrobrachium rosenbergii) hatcheries. In: Rogers GL, Day R, Lim A (Editors), Proc. First Int. Conf. Warm Water Aquaculture-Crustacea. Brigham Young University Hawaii Campus, Laie, HI. 1983; pp. 429-458.

16. Anderson IG, Shamsudin MN, Nash G. A preliminary study on the aerobic heterotrophic bacterial flora in giant freshwater prawn, Macrobrachium rosenbergii, hatcheries in Malaysia. Aquacult. 1989; 81(3-4): 213-223.

17. Sahul Hameed AS. A study of the aerobic heterotrophic bacterial flora of hatchery-reared eggs, larvae and post-larvae of Penaeus indicus. Aquacult 117(3-4): 1993; 195-204.

18. Llobrera AT, Gacutan RQ. Bacteria from sea water used in Penaeus monodon larval cultures. Quarterly Research Report, Aquaculture Department, SEAFDEC. 1977; 1(2): 38-40.

19. Keysami MA, Saad CR, Daud HM, Sijam K, Alimon AR. Isolation and identification of putative bacterial flora in juvenile Macrobrachium rosenbergii. MSA Golden Jubilee International Science Congress (ISC), Putra World Trade Centre, Kuala Lumpur, Malaysia, August 3-6, 2005. Abstract book: 92.

20. Janarthanam K, George MR, John KR, Jeyaseelan MJP. In vivo and in vitro biocontrol of  vibrio using indigenous bacterium Bacillus spp. Indian J Geomarine Sci. 2012; 41(1): 83-89.

21. Liu CH, Cheng W, Hsu JP, Chen JC. Vibrio alginolyticus infection in the white shrimp Litopenaeus vannamei confirmed by polymerase chain reaction and 16s rDNA sequencing. Dis Aquat Organ. 2004; 61: 169-174.

22. Sung HH, Hsu SF, Chen CK, Ting YY, Chao WL. Relationships between disease outbreak in cultured tiger shrimp and composition of vibrio communities in pond water and shrimp hepatopancreas during cultivation. Aquacult. 2001; 192(2): 101-110.

23. Song YL, Cheng W, Wang CH. Isolation and characterization of Vibrio damsela infection form cultured shrimp in Taiwan. J Invertebr Pathol. 1993; 61: 24-31.

24. Venkat HK, Sahu NP, Jain KK. Effect of feeding Lactobacillus-based probiotics on the gut microflora,growth and survival of postlarva of Macrobrachium rosenbergii(de Man). Aquacult Res. 2004; 35(5): 501-507.

25. Bengmark S. Ecological control of the gastrointestinal tract. The role of probiotic flora. Gut. 1998; 42(1): 2-7.

26. Rengpipat S, Rukpratanporn S. Piyatiratitivorakul S, Menasaveta P. Immunity enhancement in black tiger shrimp (penaeus mondon )by a probiont bacterium (Bacillus S11). Aquacult. 2000; 191: 271-288.

27. Gomez-Gil B, Roque A, Turnbull JF. The use and selection of probiotic bacteria for use in the culture of larval aquatic organism. Aquacult. 2000; 191(1): 259-270.

28. Zokaeifar HBalcázar JLSaad CRKamarudin MSSijam KArshad ANejat N. Effects of Bacillus subtilis on the growth performance, digestive enzymes, immune gene expression and disease resistance of white shrimp, Litopenaeus vannamei. Fish Shellfish Immunol. 2012; 33(4): 683-689.

29. Zimmerman SBSchwartz CDMonaghan RLPelak BAWeissberger BGilfillan ECMochales SHernandez SCurrie SATejera E. Difficidin and oxydifficidin: novel broad spectrum antibacterial antibiotics produced by Bacillus subtilis. I. Production, taxonomy and antibacterial activity. J Antibiot. 1987; 40(12): 1677-1681.

30. Alavandi SVVijayan KKSantiago TCPoornima MJithendran KPAli SARajan JJ. Evaluation of Pseudomonas sp. PM 11 and Vibrio fluvialis PM 17 on immune indices of tiger shrimp, Penaeus monodon. Fish Shellfish Immunol. 2004; 17(2): 115-120.

31. Vijayan KK, Bright Singh IS, Jayaprakash NS, Alvandi SV, Pai SS, Preetha R, Rajan JJS, Santiago TC. A brackishwater isolate of Pseudomonas PS-102, a potential antagonistic bacterium against pathogenic vibrios in penaeid and non-penaeid rearing systems. Aquacult. 2006; 251(2-4): 192-200.