1دانشگاه آزاد اسلامی، واحد تنکابن، گروه میکروبیولوژی
2گروه میکروبیولوژی ، دانشگاه آزاد اسلامی، واحد تنکابن
3گروه ژنتیک ، دانشگاه آزاد اسلامی، واحد تنکابن
چکیده
سابقه و هدف: طیف وسیعی از عفونت های خارج روده ای در انسان و حیوانات به وسیله سویه های اشریشیا کلی خارج روده ای (EXPEC) ایجاد می شوند. از آن جمله می توان به سویه های APEC (عامل بیماریزای طیور) و UPEC (عامل عفونت دستگاه ادراری در انسان) اشاره نمود. این مطالعه با هدف مقایسه حضور 8 ژن بیماریزایی در دو سویه UPEC و APEC و بررسی فرضیه نقش کلی باسیل های جدا شده طیور به عنوان منبع مناسب جهت پیدایش و حضور UPEC انجام شد. مواد و روش ها: در مجموع 100 نمونه اشریشیا کلی از بیماران مبتلا به عفونت ادراری و 105 نمونه از جوجه های گوشتی مبتلا به کلی باسیلوز جمع آوری گردید. پس از استخراج DNA به منظور بررسی حضور ژن های astA، iss، irp2،papC ، iucD، tsh، vatوcva/cvi از روش Multiplex PCR استفاده گردید. سپس از آزمون آماری مربع کای به منظور ارزیابی همبستگی بین سویه های APEC و UPEC استفاده شد. یافته ها: فراوانی ژن های astA، iss،irp2وpapC در سویه UPEC جدا شده از بیماران مبتلا به عفونت ادراری به ترتیب 13%، 11%، 33% و 3% بود. همچنین ژن هایiucD , tsh , vat وcva/cviدر هیچ یک از سویه های انسانی مشاهده نگردید. اما تمامی ژن های مورد بررسی در سویه های جدا شده از طیور وجود داشتند. نتیجه گیری: با توجه به شناسایی ژن های astA، iss،irp2و papC در هر دو سویه APEC و UPEC، می توان نتیجه گیری نمود که این ژن ها می توانند به عنوان عوامل موثر در حضور خارج روده ای باکتری مطرح باشند. از این میان ژن iss به دلیل دارا بودن بیشترین شیوع در هر دو سویه و نیز ژن irp2 با فراوانی 33% در سویه های UPEC، با احتمال بیشتری می توانند به عنوان مهم ترین عوامل بیماریزای در سویه های اشریشیا کلی معرفی شوند.
1. Nakazato G, de Campos TA, Stehling EG, Brocchi M, da Silveira WD. Virulence factors of avian pathogenic Escherichia coli ( APEC). Pesq Vet Bras. 2009; 29(7): 479-486.
2. Ron EZ. Host specificity of septicemic Escherichia coli: human and avian pathogens. Curr Opin Microbiol. 2006; 9(1): 28-32.
5. Bauchart P, Germon P, Bree A, Oswald E, Hacker J, Dobrindt U. Pathogenomic comparison of human extraintestinal and avian pathogenic Escherichia coli--search for factors involved in host specificity or zoonotic potential. Microb Pathog. 2010; 49(3): 105-115.
8. Zhao L, Gao S, Huan H, Xu X, Zhu X, Yang W, Gao Q, Liu X. Comparison of virulence factors and expression of specific genes between uropathogenic Escherichia coli and avian pathogenic E.coli in a murine urinary tract infection model and a chicken challenge model. Microbiology. 2009; 155(5): 1634-1644.
10. Ewers C, Antao EM, Diehl I, Phlipp HC, Wieler LH. Intestine and environment of the chicken as reservoirs for extraintestinal pathogenic Escherichia coli strains with zoonotic potential. Appl Environ Microbiol. 2009; 75(1): 184 -192.
11. Kwon SG, Cha SY, Choi EJ, Kim B, Song HJ, Jang HK. Epidemiological prevalence of avian pathogenic Escherichia coli differentiated by multiplex PCR from commercial chickens and hatchery in Korea. J Bacteriol Virol. 2008; 38(4): 179-188.
14. Dozois CM, Dho-Moulin M, Brée A, Fairbrother JM, Desautels C, Curtiss R 3rd. Relationship between the Tsh autotransporter and pathogenicity of avian Escherichia coli and localization and analysis of the Tsh genetic region. Infect Immun. 2000; 68(7): 4145-4154.
15. Ewers C, Janssen T, Kiessling S, Philipp HC, Wieler LH. Rapid detection of virulence associated genes is avian pathogenic Escherichia coli by multiplex polymerase chain reaction. Avian Dis. 2005; 49(2): 269-273.
16. Ewers C, Janssen T, Kiessling S, Philipp HC, Wieler LH. Molecular epidemiology of avian pathogenic Escherichia coli (APEC) isolated from colisepticemia in poultry. Vet Microbiol. 2004; 104(1-2): 91-101.
17. Gibbs PS, Maurer JJ, Nolan LK, Wooley RE. Prediction of chicken embryo lethality with the avian Escherichia coli traits complement resistance, colicin V production, and presence of the increased serum survival gene cluster (iss). Avian Dis. 2003; 47(2): 370-379.
18. Johanson, TJ, Siek, KE, Johanson, SJ, Nolan, LK. DNA sequence of a ColV plasmid and prevalence of selected plasmid encoded virulence gene among avian Escherichia coli strains. J Bacteriol. 2006; 188(2): 745-758.
19.Knöbl T, Gomes TAT, Vieira MAM, Ferreira F, Bottino JA, Ferreira AJP. Some adhesins of avian pathogenic Escherichia coli (APEC) isolated from septicemic poultry in Brazil. Braz J Microbiol. 2006; 37(3): 1517-8382.
20. Moon BM, Won GY, Choi YY, Jin JK, Park, JH, EO SK, Lee JH. Isolation and characteristics of avian pathogenic Escherichia coli from birds associated with colibacillosis. Proceedings of AZWMP.Chulalongkorn Uni. Fac. of Vet. Sc., Bangkok, Thailand, 26-29 Oct 2006.
22. Rocha, ACGP, Rocha SLS, Lima- Rosa, CAV, Souza GF, Moraes HLS, Salle FO, Moraes LB, Salle CTP. Genes associated with pathogenicity of avian Escherichia coli (APEC) isolated from respiratory case of poultry.Pesq Vet Bras. 2008; 28(3): 183-186.
24. Won GY, Moon BM, Oh IG, Matsuda K, Chaudhari AA, Hur J, Eo SK, Yu IJ, Lee YJ, Lee YS, Kim BS, Lee JH. Profiles of virulence-associated genes of avian pathogenic Escherichia coli isolates from chickens with colibacillosis. J poultry Sci. 2009; 46(3), 260-266.
26. Apun K, Kho KL, Chong YL, Hashimatol FH, Abdullah MT, Rahman MA, Lesley MB, Samuel L. Detection of Escherichia coli O157:H7 in Wildlife from Disturbed Habitats in Sarawak, Malaysia.Res J Microbiol. 2011; 6(2): 132-139.
27.Jafarpour M, Kalaei S, Nazemi A. molecular identification of avian pathogenic E.coli in broilers bred in northern Iran by multiplex PCR.(Accepted and Modified for publishing in Lahijan bio science journal)
28. Adiri RS, Gophna U, Ron EZ. Multilocus sequence typing (MLST) of Escherichia coli O78 strains. FEMS Microbiol Lett. 2003; 222(2): 199-203.
29. Mokady D, Gophna U, Ron EZ. Extensive gene diversity in septicemic Escherichia coli strains. J Clin Microbial. 2005; 43(1): 66-73.